澳洲胎牛血清主要的作用就是提供基本的營養物質以及提供接觸和伸展因子,那么如何分析血清的指標呢? 自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發育因子,非常適合各種細胞的培養,一旦胚胎發育*這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。有下列情況者,對血清內毒素應格外留意。
篩選養干細胞時,干細胞對內毒素非常敏感,如果血清中內毒素,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批以決定是否入圍進行試用。
養免疫細胞時,過高的內毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。基因敲除相關的細胞實驗,培養的細胞要盡可能保持其原始狀態,任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續的實驗結果“失之毫厘,謬以千里”。在準備血清和其他試劑時,選擇低的內毒素,對實驗至關重要。
如何避免澳洲胎牛血清中產生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產生:
解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。
澳洲胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。